📘 Fiche de cours
L'essentiel du cours
La biologie cellulaire repose sur deux approches complémentaires :
- La microscopie :
- Optique (MO) : Utilise la lumière visible. Résolution limitée par la longueur d'onde ($\lambda \approx 0,2 \mu m$).
- Électronique (ME) : Utilise un faisceau d'électrons.
- MET (Transmission) : Coupe ultrafine, étude de l'ultrastructure interne.
- MEB (Balayage) : Relief et surface de l'échantillon.
- Le fractionnement cellulaire :
- Homogénéisation : Broyage des tissus dans un milieu isotonique et tamponné pour libérer les organites sans les détruire.
- Centrifugation différentielle : Séparation basée sur la taille et la densité. Les éléments les plus lourds (noyaux) sédimentent en premier à faible vitesse, les plus légers (microsomes/ribosomes) à haute vitesse.
Méthodes à maîtriser
- Calculer le pouvoir séparateur : $d = \frac{0,61 \cdot \lambda}{N \cdot \sin(\alpha)}$.
- Choisir la technique selon la taille de l'objet (ex: MO pour une cellule entière, MET pour un organite).
- Interpréter un schéma de centrifugation (ordre de sédimentation : Noyaux > Mitochondries/Lysosomes > Microsomes > Cytosol).
Exemples corrigés
- Question : Quel microscope choisir pour observer le mouvement des mitochondries dans une cellule vivante ?
- Réponse : Le microscope optique (à contraste de phase), car le ME nécessite des cellules fixées (mortes) et sous vide.
Erreurs fréquentes
- Confondre grossissement (agrandissement de l'image) et pouvoir séparateur (capacité à distinguer deux points proches).
- Oublier que le milieu d'homogénéisation doit être isotonique (pour éviter l'éclatement des organites par osmose).