Méthodes d'étude de la cellule

C'est une technique qui permet de séparer les organites cellulaires en fonction de leur masse et de leur densité. On broie d'abord les cellules pour obtenir un homogénat, puis on le soumet à des vitesses de rotation croissantes. Les éléments les plus lourds (noyaux) sédimentent en premier, suivis des mitochondries, puis des microsomes.

💡 À retenir : La vitesse de centrifugation est proportionnelle à la densité de l'organite isolé.

1. Chouf l-échelle li 3ndek f tswira (par exemple 1 µm).
2. 3bar b-la règle ch7al katssawa had l-échelle f tswira (par exemple 2 cm).
3. 7wel l-wa7dat l-nfs l-wa7da (2 cm = 20 000 µm).
4. Dreb l-7isab : $G = \frac{\text{Taille sur la photo}}{\text{Taille réelle}}$.

💡 À retenir : Toujours convertir les cm en µm avant de diviser.

1. Le MET (Transmission) traverse l'échantillon : il donne une image en coupe de l'ultrastructure interne.
2. Le MEB (Balayage) balaie la surface : il donne une image en relief de la surface cellulaire.

💡 À retenir : MET = intérieur (coupe), MEB = extérieur (relief).

L-fixation hiya l-mouhimma bach n7afdo 3la l-chkel dyal l-khaliya kima hiya f l-wa9i3. Ila madernach l-fixation, l-khaliya ghat-t-telf (autolyse) bsbab l-enzymes dyalha.

💡 À retenir : La fixation stoppe le métabolisme et fige les structures cellulaires.

Les électrons traversent difficilement les tissus biologiques. Les sels de métaux lourds (uranium, plomb) se fixent sur les structures cellulaires et dévient les électrons, créant ainsi un contraste (zones sombres).

💡 À retenir : Pas de contraste = pas d'image en MET.

1. Optique : Image en couleur (souvent), résolution faible, on voit surtout le noyau et la forme globale.
2. Électronique : Image en noir et blanc, très haute résolution, on voit les détails des membranes et des crêtes mitochondriales.

💡 À retenir : Noir et blanc + détails très fins = ME.

C'est une technique utilisant des molécules marquées par des isotopes radioactifs. On suit leur trajet dans la cellule grâce à une émulsion photographique qui noircit au contact des radiations.

💡 À retenir : Utile pour suivre le devenir des protéines ou des acides nucléiques.

Oui, mais on utilise un "ultramicrotome" avec des couteaux en diamant ou en verre pour obtenir des coupes extrêmement fines (quelques dizaines de nanomètres) nécessaires au passage des électrons.

💡 À retenir : Plus la coupe est fine, meilleure est la résolution en MET.

La paraffine (utilisée pour l'inclusion) est hydrophobe. L'eau contenue dans la cellule empêcherait la paraffine de pénétrer dans les tissus. Il faut donc remplacer l'eau par un solvant organique.

💡 À retenir : Déshydratation = étape indispensable pour l'inclusion.

Elle est d'environ 0,2 µm (200 nm). En dessous de cette taille, deux points apparaissent comme un seul.

💡 À retenir : La limite est imposée par la longueur d'onde de la lumière visible.

Oui, il permet de séparer les deux feuillets de la bicouche lipidique (fracture au milieu de la membrane), révélant ainsi les protéines intramembranaires.

💡 À retenir : Le cryodécapage est la méthode reine pour étudier l'architecture membranaire.

Par centrifugation différentielle : on applique une force centrifuge faible pendant un temps court, ce qui permet de faire sédimenter les noyaux (les plus denses) au fond du tube.

💡 À retenir : La séparation se fait par paliers de vitesse.