Le génie génétique : principes et techniques

1. C'est une petite molécule d'ADN circulaire, extra-chromosomique, présente naturellement dans certaines bactéries.
2. En génie génétique, on l'utilise comme un "véhicule" (vecteur) pour transporter un gène étranger vers une cellule hôte.

💡 À retenir : Le plasmide est le transporteur indispensable pour introduire un gène dans une bactérie.

1. Regarde la séquence de l'ADN : si le site de reconnaissance est présent plusieurs fois, l'enzyme coupera autant de fois.
2. Si le plasmide est circulaire, le nombre de fragments est égal au nombre de sites de coupure.
3. Si le plasmide est linéaire, le nombre de fragments est égal au nombre de sites + 1.

💡 À retenir : Nombre de fragments = Nombre de sites (si circulaire) ou Nombre de sites + 1 (si linéaire).

1. Les bactéries se multiplient très rapidement (division cellulaire toutes les 20 min).
2. Elles possèdent une machinerie cellulaire capable de traduire l'ADN recombinant en protéine.
3. C'est une méthode peu coûteuse et efficace pour produire des protéines en grande quantité.

💡 À retenir : La bactérie est une "usine" biologique rapide et économique.

1. L'ADN génomique est l'ADN naturel de l'organisme.
2. L'ADN recombinant est une construction artificielle obtenue en fusionnant un gène d'intérêt avec un vecteur (plasmide).

💡 À retenir : L'ADN recombinant est un ADN "bricolé" en laboratoire.

1. Ils servent à sélectionner les bactéries qui ont réussi à intégrer le plasmide.
2. Si le plasmide contient un gène de résistance, seules les bactéries transformées survivront sur un milieu avec antibiotique.
3. Les bactéries sans plasmide meurent, ce qui permet d'isoler uniquement les clones d'intérêt.

💡 À retenir : L'antibiotique est un filtre de sélection pour ne garder que les bactéries transformées.

1. Non, le taux de transformation est souvent faible.
2. C'est pour cela que l'étape de sélection (sur milieu antibiotique) est indispensable pour éliminer les bactéries non transformées.

💡 À retenir : La transformation n'est jamais efficace à 100%.

1. On compare la migration du fragment avec une gamme étalon (marqueur de taille).
2. Plus le fragment est petit, plus il migre loin vers le pôle positif.
3. On mesure la distance parcourue et on la reporte sur la courbe de référence.

💡 À retenir : La distance de migration est inversement proportionnelle à la taille du fragment.

1. C'est une séquence spécifique de nucléotides (généralement 4 à 8 paires de bases) reconnue par une enzyme de restriction.
2. L'enzyme coupe toujours l'ADN au même endroit dans cette séquence.

💡 À retenir : Le site de restriction est la "cible" précise de l'enzyme.

1. Pour obtenir des extrémités "cohésives" (ou bouts collants) complémentaires.
2. Cela permet aux bases azotées du gène et du plasmide de s'apparier par complémentarité, facilitant ainsi l'action de la ligase.

💡 À retenir : La complémentarité des extrémités est la clé pour souder le gène dans le plasmide.

1. Oui, à condition de pouvoir isoler le gène responsable du caractère.
2. Il faut aussi que l'organisme hôte puisse exprimer ce gène.

💡 À retenir : Le génie génétique permet de transférer des caractères d'une espèce à une autre.

1. C'est une enzyme qui agit comme une "colle" moléculaire.
2. Elle catalyse la formation de liaisons phosphodiester entre les nucléotides pour lier les fragments d'ADN.

💡 À retenir : La ligase soude les fragments d'ADN entre eux.

1. Non, le vecteur doit être compatible avec la cellule hôte (ex: plasmide pour bactérie, virus pour cellules animales).
2. Il doit posséder une origine de réplication reconnue par la cellule hôte.

💡 À retenir : Le choix du vecteur dépend de la cellule cible.